新观点【飞诺美色谱】屈类衍生物纯化案例

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　　【飞诺美色谱】屈类衍生物纯化案例
　　
　　摘要：本验采用 Agela  Cheetah  高压制备一体机结合 PDA  检测器的方法，选择 Innoval ODS-2（10μm    100    21.2*250mm）色谱柱对屈类衍生物样品中低含量杂质6,12-二二苯氨 基屈进行了纯化。
　　
　　结果表明：6,12-二二苯氨基屈在紫外波长 270 nm 下响应比较高，用流动相 为去离子水和乙腈，进行洗脱，能够有效分离出6,12-二二苯氨基屈。
　　
　　关键词：Agela Cheetah 高压制备一体机；6,12-二二苯氨基屈；Innoval    ODS-2
　　
　　前言
　　
　　通过 PDA 检测器，检测出含量低的目标物的比较强吸收，并用质谱定位目标 峰位置，采用高压制备液相制备出目标物。
　　

　　
　　验部分
　　
　　仪器、试剂与材料 主要仪器设备
　　
　　Agela Cheetah  高压制备一体机 试剂材料
　　
　　去离子水；乙腈为色谱纯；
　　
　　高压制备柱：Innoval    ODS-2    10μm     100    21.2*250mm
　　
　　屈类衍生物样品：客户提供 样品前处理
　　
　　称取 500 mg 样品，加 5mL 二氯甲烷，5mL 乙腈溶解，0.45 μm 尼滤膜过 滤。
　　
　　制备条件 1
　　
　　仪器：Agela Cheetah  高压制备一体机；
　　
　　色谱柱：Innoval    ODS-2    10μm     100    21.2*250mm
　　
　　流动相：A：去离子水 B：乙腈； 检测器：PDA（200-400nm）
　　
　　流速：15 mL/min 进样量：50 mg
　　

　　
　　收集各组分峰馏分进行质谱分析，40-41min 组分为目标物。
　　
　　通过图 1 可知 40-41min 低含量目标物的比较佳吸收波长为 270nm。 制备条件 2
　　
　　仪器：Agela Cheetah  高压制备一体机；
　　
　　色谱柱：Innoval    ODS-2    10 μm    100    21.2*250mm
　　
　　流动相：A：去离子水 B：乙腈； 检测器：270nm ，280nm
　　
　　流速：15 mL/min 进样量：200 mg
　　

　　本验采用 Innoval    ODS-2（10μm    100     21.2*250mm）对屈类衍生物样 品中 6,12-二二苯氨基屈进行了制备， 由表 3 及图 2 可知，流动相为去离子水与 乙腈，进行梯度洗脱， 目标物与前后峰分离良好。
　　
　　结论
　　
　　关于屈类衍生物样品中低量组分 6,12-二二苯氨基屈的制备，本验采用 PDA  检测器找到制备条件的比较佳紫外波长，并用质谱分析进行定位，比较终用 Innoval    ODS-2（ 10μm     100    21.2*250mm）色谱柱进行了制备。结果表明 Innoval    ODS-2 填料对该样品中目标物与前后峰分离效果良好。